Tipurile de teste biochimice, pentru ce sunt și pentru care sunt importante

teste biochimice în microbiologie sunt un set de teste chimice care se desfășoară pe microorganismele prezente într-o probă pentru a le identifica; Aceste microorganisme sunt de obicei bacterii. Există un număr mare de teste biochimice disponibile unui microbiolog.

Cu toate acestea, alegerea acestor teste se bazează pe constatări preliminare, cum ar fi trăsăturile Gram model de colorare și de creștere, care permit bacteriilor să aloce o anumită categorie. Testele biochimice se bazează în principal pe proprietățile metabolice ale fiecărui tip de bacterii.

Nu toate bacteriile au aceleași proprietăți, deci se investighează dacă au o anumită enzimă prin adăugarea substratului și așteptarea apariției reacției. În mod obișnuit, această determinare este dată de schimbarea culorii sau a pH-ului în mediul de cultură.

Adesea, mai puțin de 15 teste biochimice sunt necesare pentru identificarea fiabilă a unei bacterii până la nivelul speciilor. Efectuarea mai multor teste biochimice poate crește încrederea în identificare.

Majoritatea acestor teste biochimice se efectuează în plasmă serică sau sanguină. Cu toate acestea, ele pot fi, de asemenea, efectuate în alte secreții biologice cum ar fi: urină, lichid cefalorahidian, lichid pleural și fecale, printre altele.

index

• 1 Clasificare
  • 1.1 Universal
  • 1.2 Diferențiale
  • 1.3 Specific
• 2 Tipuri de teste biochimice
  • 2.1 Testul catalazei
  • 2.2 Testul oxidazei
  • 2.3 Testul agar cu manitol salutat (MSA)
  • Testul de coagulază
  • 2.5 Testul ureazei
• 3 Care sunt testele biochimice?
• 4 Importanță
• 5 Referințe

clasificare

Testele biochimice pot fi clasificate în 3 grupe:

universal

Acestea sunt testele care pot fi efectuate pe orice probă și care ghidează microbiologul asupra următoarelor teste biochimice care trebuie efectuate pentru a obține o identificare sigură.

exemplu

Testul de catalază și oxidază.

diferențialele

Acestea sunt testele efectuate pentru a identifica microorganismele prezente în probă până la nivelul speciilor.

Identificarea se face pe baza rezultatelor unei combinații de teste, deoarece rezultatele individuale nu sunt suficient de informative pentru a face identificarea.

exemplu

Teste IMViC și teste de utilizare a zahărului.

specific

Acestea sunt teste specifice pentru un anumit set de specii sau pentru subtipul unei specii. Aceste teste sunt de obicei efectuate pentru a confirma sau a identifica la nivelul subspecii. Testele individuale sunt informative de la sine.

exemplu

Testul y-glutamil aminopeptidazei.

Tipuri de teste biochimice

Testul catalazei

Testul de catalază este un test pentru a demonstra prezența enzimei catalazice prin descompunerea peroxidului de hidrogen în oxigen și apă. O cantitate mică de bacterii este adăugată la o picătură de peroxid de hidrogen (3%) pe diapozitiv.

Testul catalazei este un test simplu utilizat de microbiologi pentru a ajuta la identificarea speciilor de bacterii si pentru a determina abilitatea unor microbi de a descompune peroxid de hidrogen, prin producerea enzimei catalaza.

Dacă se observă bule de oxigen înseamnă că bacteria are enzima catalaza, deoarece aceasta catalizează descompunerea peroxidului de hidrogen în oxigen și apă. Se spune apoi că organismul este catalază pozitiv (de exemplu: Staphylococcus aureus).

Testul oxidazei

Acest test este utilizat pentru a identifica microorganismele care conțin enzima citocrom oxidază (importantă în lanțul de transport al electronilor). Este folosit în mod obișnuit pentru a distinge între familiile Enterobacteriaceae și Pseudomadaceae.

Citocrom oxidaza transferă electronii din lanțul de transport al electronilor către oxigen (acceptorul de electroni finali) și îl reduce la apă. În testul oxidazei sunt furnizate molecule donatoare și acceptoare artificiale de electroni.

Când donorul de electroni este oxidat de acțiunea citocrom oxidazei, mediul devine purpuriu închis și este considerat un rezultat pozitiv. Microorganismul Pseudomonas aeruginosa este un exemplu de bacterie pozitivă de oxidază.

Testul de agar cu manitol sărat (MSA)

Acest tip de test este atât selectiv, cât și diferențial. MSA va selecta organisme capabile să trăiască în medii cu concentrații mari de sare, cum ar fi speciile de stafilococ în contrast cu speciile de Streptococcus, a cărui creștere este inhibată în aceste condiții.

Componenta diferențială din acest test este manitolul de zahăr. Organismele capabile să utilizeze manitol ca sursă alimentară va produce produși secundari de fermentație, care sunt acide și, prin urmare, scade pH-ul mediului.

Aciditatea mediului determină faptul că indicatorul de pH, roșu fenol, devine galben. Exemple de specii bacteriene care pot fi diferențiate prin această metodă sunt: Staphylococcus aureus (pozitiv pentru că fermentează manitol) și Staphylococcus epidermidis (negativ pentru că manitolul nu fermentează).

Testul de coagulază

Coagulaza este o enzimă care ajută la coagularea plasmei sanguine. Acest test se efectuează pe bacterii pozitive gram-pozitive și catalază-pozitive pentru a le identifica Staphylococcus aureus (coagulază pozitivă). De fapt, coagulaza este un factor de virulență al acestei specii bacteriene.

Formarea cheagurilor în jurul unei infecții cauzate de această bacterie o protejează probabil de fagocitoză. Acest test este foarte util atunci când doriți să faceți o diferențiere Staphylococcus aureus din alte specii de stafilococ care sunt coagulaze negative

Testul pentru urează

Acest test este utilizat pentru a identifica bacteriile capabile să hidrolizeze ureea, utilizând enzima urează. Este folosit în mod obișnuit pentru a distinge sexul Proteu de alte bacterii enterice.

Hidroliza ureei produce amoniacul ca unul dintre produsele sale. Această bază slabă crește pH-ul mediului de peste 8,4 și indicatorul de pH (roșu fenol) se schimbă de la galben la roz. Un exemplu de bacterie pozitivă de urează este Proteus mirabilis.

Pentru ce teste biochimice?

Testele biochimice din microbiologie sunt folosite pentru a diagnostica bolile cauzate de microbi și pentru a monitoriza tratamentele administrate pentru a le combate. În plus, ele sunt utilizate pentru screening-ul bolilor infecțioase și pentru prognosticul lor.

Identificarea biochimică a microorganismelor oferă o idee despre ce pot face aceste microorganisme, fiind posibilă discriminarea diferitelor tulpini ale aceleiași specii prin profiluri biochimice specifice.

Diferențele în activitățile enzimatice specifice se referă la ecologia, fiziologia sau habitatul natural al microorganismului, care, în unele cazuri, pot fi considerate informații importante.

importanță

Diferențele structurale în ceea ce privește forma, dimensiunea și dispunerea bacteriilor ajută foarte puțin în procesul de identificare, deoarece există multe specii de bacterii care au o formă, o dimensiune și un aranjament similar.

Din acest motiv, în ultimă instanță identificarea bacteriilor se bazează în principal pe diferențele dintre activitățile lor biochimice.

Fiecare specie de bacterii are un set bine definit de activități metabolice diferite de celelalte specii. Aceste "amprente" biochimice sunt proprietăți controlate de enzime bacteriene.

Astfel, testele biochimice sunt importante deoarece acestea îi ajută pe cercetător să identifice corect agenții patogeni prezenți într-o probă și, în felul acesta, să poată recomanda tratamentul adecvat pentru pacient.

referințe

1. Beckett, G., Walker, S. și Rae, P. (2010). Biochimie clinică (Ediția a 8-a). Wiley-Blackwell.
2. Clarke, P.H., & Cowan, S.T. (1952). Metode biochimice pentru bacteriologie. Oficial al Microbiologiei Generale, 6(1952), 187-197.
3. Gaw, A., Murphy, M., Srivastava, R., Cowan, R., St, D. & O'Reilly, J. (2013). Biochimie clinică (Ediția a 5-a). Elsevier Health Sciences.
4. Goldman, E. și Green, L. (2008). Manualul practic de microbiologie (Ediția a 2-a). CRC Press.
5. Harrigan, W. (1998). Metode de laborator în microbiologie alimentară (Ediția a treia). Academic Press.
6. Vasanthakumari, R. (2009). Microbiologie practică. BI Publicații Pvt Ltd.