Ce este simpla colorare? Caracteristici de top

simpla colorare Este o procedură rapidă și simplă de colorare în care se utilizează o singură colorant, de aceea se numește simplu. Se utilizează în principal pentru a determina morfologia și organizarea celulelor prezente într-o probă.

Bineînțeles că celulele nu au culoare, deci este necesar să le facem vizibile într-un fel atunci când sunt observate în microscop.

Este important de subliniat faptul că coloranții utilizați în colorarea simplă trebuie să fie de bază cu o încărcătură pozitivă (cationică), astfel încât să se poată lega spontan de peretele celular și de citoplasmă.

Aceste structuri celulare sunt încărcate negativ. Acesta este motivul pentru care colorantul, încărcat pozitiv, este atras de celule și le leagă spontan. Astfel, toate celulele prezente într-o probă sunt colorate rapid.

Coloranți utilizați în colorarea simplă

Există mai mulți coloranți de bază care pot fi utilizați în laboratorul de microbiologie. Cele mai utilizate sunt:

- Albastru de metilen.

- Violet de cristal.

- Verde malachit.

- Fucsin de bază.

Toate aceste coloranți funcționează bine în bacterii deoarece au ioni colorați (cationici) colorați pozitiv (cromofori).

Timpii de colorare pentru majoritatea acestor coloranți sunt relativ scurți. De obicei, acestea variază de la 30 de secunde la 2 minute, în funcție de afinitatea colorantului.

Este important să rețineți că, înainte de vopsirea unei mostre prin simpla colorare, aceasta trebuie extinsă și fixată pe glisorul de sticlă; Eșantionul extins și fix se numește frotiu.

Cei 6 pași pentru a efectua o simplă colorare

Pasul 1

Plasați diapozitivul pe un suport de colorare și aplicați colorantul dorit. Să acționăm timpul corespunzător.

În mod normal, simpla colorare durează câteva secunde sau câteva minute, în funcție de colorantul utilizat.

observație

În acest pas este important să nu se depășească timpul recomandat pentru vopseaua utilizată, deoarece cristalele se pot forma pe foaie, producând ceea ce se numește "artefacte" care distorsionează morfologia celulelor.

Pasul 2

Spălați cu atenție frotiul diapozitivului cu apă distilată dintr-o sticlă sau, de asemenea, cu apă de la robinet care curge lent, până când scurgerea devine transparentă. Aceasta durează de obicei 5 până la 10 secunde.

observație

Nu aplicați curentul de apă direct pe frotiu, pentru a preveni ca forța acestuia să deterioreze eșantionul.

Dacă nu aveți apă distilată, puteți folosi apă de la robinet fără probleme, deoarece nu va afecta rezultatul colorării.

Pasul 3

Uscați diapozitivul cu prosoape de hârtie absorbante într-o singură direcție și fără frecare. Asigurați-vă că partea inferioară a diapozitivului este curată.

Pasul 4

Observați frotiul colorat pe microscop. Începeți cu cele mai îndepărtate obiective pentru a localiza în mod corespunzător zona pe care doriți să o observați mai detaliat. Schimbarea obiectivului pentru a vă apropia și mai aproape de eșantion.

observație

Pentru utilizarea lentilei cu cea mai mare mărire (în mod normal 100X), trebuie utilizat ulei de imersie, deoarece ajută la lumina să penetreze mai bine și imaginea să fie mai clară. Nu este necesar să folosiți un capac.

Pasul 5

În cele din urmă, aruncați toate eșantioanele într-un recipient corespunzător care este denumit corespunzător "biohazard".

referințe

1. (2001). Aplicații microbiologice: Manual de laborator în Microbiologie generală (8 ^lea ed.). Companiile McGraw-Hill.
2. Harisha, S. (2006). O introducere în biotehnologia practică (1^st). Firewall Media.
3. Moyes, R. B., Reynolds, J., & Breakwell, D. P. (2009). Colorare preliminară a bacteriilor: pete simple. Protocoale actuale în microbiologie, (SUPPL 15), 1-5.
4. Pommerville, J. (2013). Alcamo Fundamente de laborator de Microbiologie (10^lea). Jones & Bartlett Learning.
5. Prescott, H. (2002). Exerciții de laborator în microbiologie (5 ^lea). Companiile McGraw-Hill.
6. Sumbali, G. și Mehrotra, R. (2009). Principiile Microbiologiei (1^st). Tata McGraw-Hill Education.