Nephelometrie în ceea ce consta și aplicații

nefelometrie constă în măsurarea radiațiilor cauzate de particule (în soluție sau în suspensie), măsurând astfel puterea radiației împrăștiate la un unghi diferit de direcția radiației incidentate.

Când o particulă în suspensie este atinsă de un fascicul de lumină, există o parte a luminii care este reflectată, o altă porțiune este absorbită, o altă porțiune este deviată și restul este transmis. De aceea, atunci când lumina atinge un mediu transparent în care există o suspensie de particule solide, suspensia este observată înnorată.

index

• 1 Ce este nephelometria?
  • 1.1 Dispersia radiației prin particule în soluție
  • 1.2 Nephelometru
  • 1.3 Abaterile
  • 1.4 Caracteristici metrologice
• 2 Aplicații
  • 2.1 Detectarea complexelor imune
  • 2.2 Alte aplicații
• 3 Referințe

Ce este nephelometria?

Dispersia radiației prin particule în soluție

În momentul în care un fascicul de lumină lovește particulele unei substanțe în suspensie, direcția de propagare a fasciculului își schimbă direcția. Acest efect depinde de următoarele aspecte:

1.Dimensiuni ale particulei (mărime și formă).

2. Caracteristicile suspensiei (concentrație).

3. Lungimea și intensitatea luminii.

4. Distanța de lumină incidentă.

Unghiul de detecție.

6. Indicele de refracție al mediului.

nefelometru

Nefelometrul este un instrument folosit pentru măsurarea particulelor suspendate într-o probă lichidă sau într-un gaz. Deci o fotocelulă plasată la un unghi de 90 ° față de o sursă de lumină detectează radiația prin particulele prezente în suspensie.

De asemenea, lumina reflectată de particule spre fotocelula depinde de densitatea particulelor. Diagrama 1 prezintă componentele de bază care compun un nephelometru:

A.Sursă de radiații

În nephelometrie este extrem de important să existe o sursă de radiație cu o luminozitate ridicată. Există diferite tipuri, de la lămpi cu xenon și lămpi cu vapori de mercur, lămpi cu halogen cu tungsten, radiații laser, printre altele.

B. Sistemul monocromat

Acest sistem este localizat între sursa radiației și cuvetă, astfel încât să se evite incidența radiației cu unde de radiație diferite în comparație cu radiația dorită.

În caz contrar, reacțiile de fluorescență sau efectele de încălzire din soluție ar provoca abateri de la măsurare.

C. Citirea cuvei

Este un container în general prismatic sau cilindric și poate avea dimensiuni diferite. În aceasta este soluția studiată.

D. detector

Detectorul este localizat la o anumită distanță (de obicei foarte aproape de rezervor) și are sarcina de a detecta radiația dispersată de particulele suspensiei.

E. Sistem de citire

În general, este vorba de o mașină electronică care primește, convertește și procesează date, ceea ce reprezintă în acest caz măsurătorile obținute din studiul realizat.

abateri

Fiecare măsurătoare este supusă unui procentaj de eroare, care este dat în principal de:

Galeti contaminate: în cuve orice agent extern al soluției de studiu, care este în interiorul sau în exteriorul cuvei, reduce lumina radiantă pe calea spre detector (cuvele defecte, praful aderent la pereții cuvei).

interferențe: prezența unor contaminanți microbieni sau a turbidității dispersează energia radiantă, crescând intensitatea dispersiei.

Compuși fluorescenți: aceștia sunt compuși care, atunci când sunt excitați de radiația incidentă, cauzează o citire eronată și ridicată a densității dispersiei.

Conservarea reactivilor: temperatura inadecvată a sistemului ar putea provoca condiții nefavorabile studiului și ar putea induce prezența reactivilor turbidici sau a precipitatelor.

Fluctuațiile energiei electrice: Pentru a evita ca radiația incidentă să fie o sursă de eroare, stabilizatorii de tensiune sunt recomandați pentru radiația uniformă.

Caracteristici metrologice

Deoarece puterea radiantă a radiației detectate este direct proporțională cu concentrația de masă a particulelor, studiile nephelometrice au - în teorie - o sensibilitate metrologică mai mare decât alte metode similare (cum ar fi turbidimetria).

În plus, această tehnică necesită soluții diluate. Aceasta permite minimizarea fenomenelor de absorbție și de reflexie.

aplicații

Studiile nephelometrice ocupă o poziție foarte importantă în laboratoarele clinice. Aplicațiile variază de la determinarea imunoglobulinelor și a proteinelor de fază, complement și coagulare acută.

Detectarea complexelor imune

Când o probă biologică conține un antigen de interes, se amestecă (într-o soluție tampon) cu un anticorp pentru a forma un complex imunitar.

Nefelometria măsoară cantitatea de lumină care este împrăștiată de reacția antigen-anticorp (Ag-Ac), și astfel se detectează complexe imune.

Acest studiu poate fi realizat prin două metode:

Nefelometria punctului final:

Această tehnică poate fi utilizată pentru analiza punctului final, în care anticorpul probei biologice studiate este incubat timp de douăzeci și patru de ore.

Complexul Ag-Ac este măsurat utilizând un nephelometru și cantitatea de lumină împrăștiată este comparată cu aceeași măsurare efectuată înainte de formarea complexului.

Nefelometria cinetică

În această metodă, rata de formare complexă este monitorizată continuu. Rata de reacție depinde de concentrația antigenului din probă. Aici măsurătorile sunt luate ca o funcție a timpului, deci prima măsurare este luată în momentul "zero" (t = 0).

Nefelometria cinetică este cea mai utilizată tehnică, deoarece studiul poate fi efectuat într-o oră, în comparație cu perioada lungă de timp a metodei punctului final. Raportul de dispersie este măsurat imediat după adăugarea reactivului.

Prin urmare, atât timp cât reactivul este constant, cantitatea de antigen prezent este considerată direct proporțională cu rata de schimbare.

Alte aplicații

Nefelometria este folosită în general pentru analiza calității chimice a apei, pentru determinarea clarității și pentru controlul proceselor de tratare a acesteia.

De asemenea, este utilizat pentru a măsura poluarea aerului, în care concentrația particulelor este determinată de dispersia pe care o produc în lumină incidentă.

referințe

1. Britannica, E. (s.f.). Nefelometrie și turbidimetrie. Recuperat de la britannica.com
2. Al-Saleh, M. (s.f.). Turbidimetrie și nephelometrie. Adus de la pdfs.semanticscholar.org
3. Bangs Laboratories, Inc. (s.f.). Recuperat de la technochemical.com
4. Morais, I. V. (2006). Analiza debitului turbidimetric și nephelometric. Adus de la repositorio.ucp.p
5. Sasson, S. (2014). Principii de nefelometrie și turbidimetrie. Adus de la notesonimmunology.files.wordpress.com
6. Stanley, J. (2002). Essentials de imunologie și serologie. Albany, NY: Învățarea lui Thompson. Descărcat de la books.google.co.ve
7. Wikipedia. (N.d.). Nephelometrie (medicament). Adus de la en.wikipedia.org